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【 摘 要】 微 生物传 感器具有选择性好 、 灵敏度 高、 操作 简便快速 、 成 本低、 能在复杂体 系中进行在 线连 续监 测等特点 , 已在 临床 医学、 食品 分析 、 发 酵工业、 环境监 测等领 域显示出广阔的应 用前景 。 随着纳米技 术的发展 , 微 生物传 感器的研 究和应 用取得很大的进展 , 已经成 为最有 用 的监控环 境的手段之 一, 本文综述 了 微 生物传 感器在监 测大气、 水质、 土壤 污染等 方面的应 用, 并对其前景进行 了 展 望。 【 关键词 】 微 生物传感器 ; 纳米技 术 ; 污染检 测 ; 环境
虽然微生物电极法可缩短测定 时间. 但微 生物 固定化膜 的制作工 艺复杂且容 易污染 . 同时单一 菌种底物利用 范围有限 . 在一定程 度上 限制 了微生物 电极 的使用 近年来 . 人们利用 从污水 和活性 淤泥 中富 集 的电化学 活性微生物 .构建 了多种有 介体或无介体微生 物燃 料 电 池. 同时发现 电流 ( 电压 ) 或电子库仑量与电子供体的含量之间存在对 应关 系 .因此微生物燃 料 电池能用 于某些底物含量 的测定 .如废水 B OD 以及有毒物质 等. 其中用于废水 中 B O D测定 的研究最为成熟。 2 . 2 . 2 重 金 属 检 测 重金属 污染广泛存在于环境 中. 它能通过生物富集作用对动植物 及人类 产生危 害 利用分析化学方法检测重金属离子对其 生物危 害缺 1 微生物传感器的发展过程 乏直接检定 .生物传感 器检测重金属 离子吸引 了越来越 多的研究兴 微 生物传感 器是指 利用一定 的 固定化方 法将 生物敏 感元件 ( 对 趣 。 特定 污染物 有感应 能力 的微生物菌 株 ) 与具有信号 转换 功能 的介质 发光微生物传 感器是 目前生 物毒性测试 中研究 最多的微生物传 相连 . 并借 助一定 的设备将 信号放 大输 出 由于微 生 物传感器 的核 感器之一最常用 的生物发光系统是用于水体毒性 实验 的 Mi c r o t o x 法 心部 分是具 有生物 活性 的微生物细 胞 . 而微生物在 其数量 、 大小 、 繁 评价早在 1 9 9 5 年 国家环境保护总局就颁布 了水质急性毒性 的测定 殖、 遗传 改造 等方 面均具 有 独特 的优势 . 因此可 以满 足环 境监 测 中 发光细菌法行业标 准 李书钺[ 7 1 以明亮发光杆菌作为指示生物 , 研制 的 快速 简单 、 原位 、 低成本 的要求 。 传感器 将可 同时分析 P b 2 + , c r 6 . 、 C d 2 + 、 H 、 C u z + 对发 光细 菌 的毒 性作 1 9 7 5 年D e v i s _ l _ 制成 了第一支微生物传感 器 在微生 物传感器研 用 , 该传感器与传 统实验方法具有较高 的相关性。 制 中最关键 的是微生物 的固定技术 . 固定后 的微 生物应尽可能保证 细 wa n g等 采用嗜冷杆 菌( P s y c h r o b a c t e r s p . ) 微生物传感器 毒性分 析 胞活性 和避免 细胞从膜 中流失 .以延长微 生物传 感器的使用寿命 . 传 系统 , 对 H、 c u 、 z n 、 c 、 C d n、 P b 、 c 0 2 一 等重金属和邻氯苯酚( 2 一 C P ) 、 统 的生物材料 固定方 法包括物理 吸附 、 共价 键合 、 交联 到一定 的载体 2 , 4 一 二氯酚( 2 , 4 一 D C P ) 、 邻硝基酚( 2 一 N P ) 、 对硝基酚( 4 一 N P ) 、 四环 素 、 十二 基质上 或包埋 于有 机聚合 物的基 质中 . 然而这些方法都存在稳定期 短 烷基苯磺酸钠( L A S ) 等有 机物的生物急性毒性进行分析 。试验结果 表 和固定 时引起微 生物的损 伤等缺陷 明. 基于对数生长后期和稳定期 的嗜冷杆菌微 生物传感器具 有 良好的 纳米技 术的出现提供 另一种更好的固定方 法 . 纳米管 与聚合 物复 毒性分析性能 A m a r o 等呗 0 以四膜虫 ( T e t r a h y m e n a t h e r m o p h i l a M T T 1 、 合 材料用于 电化学 传感具有很 多优点 . 如 制备简单 . 易于制成 同一 厚 M T T 5 金属硫蛋 白激活子 的真核生物荧光 素蛋 白基 因作 为信号载体 . 度的膜等 , 可以有效地提高生物传感器的重现性。 导 电聚合 物( 如聚吡 开发全细胞生物传感器 . 其检测重金属离子 的灵敏性 可与原核生物相 咯、 聚苯胺 、 聚嚷 吩等) 制 成的导电聚合物 膜具有 良好 的导 电性 . 易于 当。 电子在生物 活性物质与 电极之 间传递 .可用于制作 第三代生物 传感 基 因工程微 生物 在重金 属离 子检测 方面也 发挥 了作用 。 器 1 O年前 已经 出现 的微生物燃料 电池 ( ( Mi c r o b i a l F u e l c e 1 1 , MF C ) ) 技 R a v i k u m a r 等[ t 0 1 通过生物技术手段将对 z n 、 c u 敏感 的两种 启动子融 术正进入快速发展时期 . 这些进步均有助于促进 了微 生物传感技术的 合 为双标记报告 蛋 白, 开发 出检 测 z n 、 c u z + 的微生物传感器 , 最低检 发 展 出浓度分别 为 1 6 1 z M和2 6 L L M L i u等l l 】 1 从恶臭假单胞菌筛选出对 z n “ 的特 异性启 动子 c z c R 3融合 到增强型绿色荧光蛋 白( e g f p ) , 研制 出用于 2 在 环 境 监 测 中的 应 用 特异性 的检测 z n 。 + 含量的生物传感 器 S i n g h等【 2 1 固定小球 藻于玻璃碳 2 . 1 大 气 检 测 电极 膜上研 制微生 物传感器监测 H g 2 _ 。具有 良熊猫体育官方网站好的响应时 间、 和持久 s 0 是 酸雨 酸雾 形 成 的主 要原 因 .传 统 的检 测 方法 很 复 杂 。 性, 电极 响应 的线性 Hg “ 浓 度范 围为 1 0 M~ 1 0 M, 可保持 1 4天使用 S a s a k i ( 1 9 9 7 ) 将一种 氧化亚铁 硫杆 菌( T h i o b a c i l l u s f e r r o O X i d a n s )  ̄ j I 成微 期 。 生物传感器 . 可 以监测酸雨 中的硫酸盐 王 晓辉等 分别 以氧化硫硫杆 用死去的生物被动 吸收重金属是一种更有效 、 经济 、 简单 的方法 。 菌和多功能硫杆菌为分子识别元件 . 制备 了硫化物 和亚硫酸盐微生物 死 细胞 与活细胞相 比, 不需要营养 . 易于处理和储存 , 耐高毒性 的反应 电极 . 实验 证明 . 电极的响应 时间为 3 - 6分钟, 以氧化 硫硫杆菌为分子 环境 将铜绿 假单胞菌烘 干后构建微生物传感 器检测重金属 P h “ . 得 识别 元件 的 电极 选择性 好 .它对 S 一 的线 性范 围为 O . O 6 ~ 3 . O ms m, 对 出其对 P h 的线 . O I .  ̄ M到2 . 0  ̄ M. 最低检测量为 0 . 6 1 x M t 。 s O 的线 m g / L 但 对于此类传感器 后续报 道不 多。 此 2 - 3 农 药 污染 监 测 外还有用 于 N O 检测的微生物传感器[ 3 1 。 我国是一个农 业大国 .农药是农业生产 中十分重要 的生产资料 , 2 . 2 水 质熊猫体育官方网站 监 测 而有机磷农药 ( 0 r g a n 叩h o s p h a t e s , 0 P s ) 是 目前应用 范围最广 , 使用 量最 2 . 2 . 1 B OD检测 大的农药之一 由于过度使用 O P s 引发 的环境问题 日益严 重 , 与此同 生化需 氧量 ( B i o e h e m i c a l O x v g e n D e m a n d ) 简称 B O D, 是水 体 中微 时人们对于食品安全问题也 日益关注��
S c i e n c e & Te c h n o l o g y Vi s i o n
付 Байду номын сангаас 林初 文 陈 群 2 ( 1 . 山东省滨 州 畜牧兽 医研 究 院 , 山东 滨州 2 5 6 6 0 0 ; 2 . 北京 尚洋 东 方环境 科 技股 份有 限公 司 , 中国 北京 1 0 0 0 8 1 )
由于人们 在追求经济效益的同时对环境保护的意识不够 . 环 境污 染 变得突 出. 但传 统的检测方 法通常需要 一定的分 析技术 . 专业 的实 验室 . 人们需要找到一种简单 , 快速 . 便携的方法来检测各种 有机和无 机化学污染物 . 生物传感器可很好的锯决这个 问题根据 生物传感器 中所用分子识别元件上的敏感物质不同 .可以将生物传感器 分为 : 酶 传感器 、 微生物传感器 、 免疫传感器 、 组织传感器 、 细胞传感器 。 其 中酶 传感器和微生物传感器研究得最多 . 应用也最为广泛 。本 文主要介绍 微生物传感器 的发展及其在环境检测 中的应用
