花粉活力测定的3种方法docx
实验 16 花粉活力的测定 在作物杂交育种、 作物结实机理和花粉生理的研究中, 常涉及花粉活力的鉴定。掌握花粉活力快速测定的方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示 内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。 一、花粉萌发测定法 【原理】 正常的成熟花粉粒具有较强的活力,在适宜的培养条件下便能萌发和生长,在显微镜下可直接观察计算其萌发率,以确定其活力。 【器材与用具】 载玻片;显微镜;玻棒;恒温箱;培养皿;滤纸。 【试剂】 培养基: 10%蔗糖, 10mg/L 硼酸, %的琼脂。称 10g 蔗糖、 1mg 硼酸、琼脂与 90ml 水放入烧杯中,在 100℃水浴中熔化 ,冷却后加水至 100ml 备用。 【方 法】 1.将培养基熔化 后,用玻棒蘸少许,涂布在载玻片上,放入垫有湿润试纸的培养皿中,保湿备用。 2.采集丝瓜、南瓜或其他 葫芦科植物刚开放或将要开放的成熟花朵,将花 粉洒落在涂有培养基的载玻片上,然后将载玻片放置于垫有湿滤纸的培养皿中, 在 25℃左右的恒温箱(或室温 20℃条件下)中孵育, 5~10min 后在显微镜下检查 5 个视野,统计其萌发率。 【注意事项】 1.不同种类植物 的花粉萌发所需温度、 蔗糖和硼酸浓度不同, 应依植物种类而改变培养条件。 2.此法也可用于 观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度, 离体时间,环境条件等因素对花粉活力的影响。 3.不是所有植物的花粉都 能在此培养基上萌发,本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。 二、碘 - 碘化钾染色测定法 【原理】 多数植物正常的成熟花粉粒呈球形,积累较多的淀粉, I2-KI 溶液可将其 染成蓝色。发育不良的花粉常呈畸形, 往往不含淀粉或积累淀粉较少, I2-KI 溶液染色呈黄褐色。因此,可用 I2-KI 溶液染色来测定花粉活力。 【器材与用具】 显微镜;载玻片与 盖玻片;镊子;棕
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